El Prado no descansa y amplía su horario abriendo todos los días de la semana.El Real Museo de Pintura y Escultura se abre al público en 1819, teniendo como sede el edificio que el arquitecto Juan de Villanueva había proyectado como Gabinete o Galería de Historia Natural. El Marqués de Santa Cruz y el pintor Vicente López se encargan de la selección de las piezas expuestas: unas mil quinientas obras procedentes de las colecciones reales. Pasa a denominarse Museo Nacional del Prado en 1965, al producirse la separación entre los bienes del patrimonio de la Corona y los del Real Museo de Pintura y Escultura. En 1872 se incorporan los fondos del disuelto Museo de la Trinidad.

En 1920 pasa a depender del Ministerio de Instrucción Pública y en 1971 entran a formar parte de las colecciones las obras del siglo XIX guardadas hasta esa fecha en la Sección de Arte Moderno del Museo Español de Arte Contemporáneo. Dentro de la impresionante calidad de sus fondos, puede destacarse la excelencia de las escuelas flamenca, española del siglo XVII y veneciana del siglo XVI. En sus salas podemos encontrar obras maestras de El Bosco, Van der Weyden, El Greco, Tiziano, Tintoretto, Veronés, Rubens, Velázquez, Ribera, Zurbarán, Murillo o Goya. El Museo del Prado ha sido responsable de importantes exposiciones temporales y también organiza seminarios y ciclos de conferencias de gran calidad. En 1980 se funda la Asociación de Amigos del museo y empieza a publicarse el Boletín del Museo del Prado. Rafael Moneo llevó a cabo la ampliación del edificio del Museo, cuyas nuevas salas fueron inauguradas en 2007.